AAV病毒载体类细胞治疗质量研究与控制
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AAV病毒载体类细胞治疗质量研究与控制
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质粒 ↓ |
转染 → | |
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项目 |
内容 |
技术 |
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外观 |
外观 |
目视法 |
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pH |
pH |
pH计 |
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鉴别 |
限制性内切酶酶切 |
限制性内切酶酶切 |
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测序 |
测序仪 |
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质粒含量 |
浓度/含量 |
UV |
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纯度 |
A260/A280 |
UV |
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超螺旋比例 |
AEX-HPLC Agilent 5200/5300 Fragment Analyzer |
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杂质 |
宿主菌DNA残留 |
qPCR Agilent 5200/5300 Fragment Analyzer |
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宿主菌RNA残留 |
Agilent 5200/5300 Fragment Analyzer |
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宿主蛋白残留 |
ELISA LC-MS |
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抗生素残留 |
LC-MS |
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安全性 |
内毒素 |
鲎试剂法 |
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无菌/微生物限度 |
薄膜过滤法 |
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病毒 ↓ |
感染 → |
细胞制剂 |
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项目 |
内容 |
技术 |
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外观 |
外观 |
目视法 |
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鉴别 |
核酸水平(病毒载体和目的基因测序) |
限制性酶切图谱分析 聚合酶链式反应（PCR） 逆转录-聚合酶链反应（RT- PCR） 测序仪 |
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蛋白水平（结构蛋白） |
衣壳蛋白亚基比例（Agilent 2100微流控电泳） 衣壳蛋白结构表征（LC-MS） |
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病毒滴度 |
物理滴度（病毒总颗粒数） |
ELISA Wyatt AF4-MALS |
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转导滴度（病毒感染性颗粒数） |
细胞基因组提取及定量 PCR、流式细胞术 |
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纯度 |
纯度 |
HPLC SDS-PAGE UV |
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产品相关杂质 |
错误包装颗粒、空衣壳颗粒、聚集体 |
Wyatt SEC MALS Wyatt AF4-MALS |
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工艺相关杂质 |
外源核酸序列 |
PCR |
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残留宿主细胞蛋白 |
ELISA LC MS |
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试剂残留 |
LC/LC-MS GC/GC-MS |
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生物学活性 |
生物学活性 |
根据产品制定 |
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一般物理特性 |
外观 |
目视法 |
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可见异物 |
目视法 |
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不溶性微粒 |
粒度仪 |
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装量 |
重量法 |
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渗透压 |
渗透压仪 |
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pH |
pH计 |
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安全性 |
内毒素 |
鲎试剂法 |
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无菌 |
薄膜过滤法 |
